解决方案
ANDOR Revolution Custom System

今天的活细胞成像,已经从单纯的结构或定位分析,转向对功能的分析与研究。科学家想在三维、多标记条件下观察最真实的动态自然的生命过程,需要一个不损伤细胞、低光漂白、高信噪比、高时空辨率的成像条件,Andor Revolution活细胞激光共聚焦显微镜使得这一切成为可能。

基于Andor全球领先的iXon系列单光子探测器,结合Yokogawa独有专利技术的Nipkow双转盘激光共聚焦扫描单元CSU-X1, Revolution系统能够达到每秒钟2,000幅共聚焦图像的帧速。Andor Revolution系统与其它类似系统最大的不同在于,它不是将多方系统简单的拼凑在一起,而是以Andor iCam控制技术为核心,无缝融合软硬件控制技术,全面优化系统电动外设控制时序,全部选用AOTF调谐控制的性能更优异的DPSS半导体泵浦固体激光器。  

对活细胞或组织动态过程或极度光敏感过程的3维(x、y、z),4维(x、y、z、时间),5维(x、y、z、时间、多波长),6维(x、y、z、时间、多波长、位置)实时记录和观察,并组合激光诱导动力学示踪装置FRAPPA、全内反射荧光装置TIRF、光镊及显微激光切割技术,研究细胞中单分子的动态特性、动态矢量,实现对样品的精确至单像素光学操作的超快成像,满足细胞生物学、分子医学、神经生物学、癌症生物学和发育生物学等多学科及交叉学科研究中的各种需求。
 
放置于显微镜焦平面的Nipkow双转盘,扫描转盘有2万个按等速角螺旋线分布的针孔,聚光转盘放置有与针孔位置精确对中的微聚透镜。两个转盘同步高速旋转,激发光与发射荧光均经过针孔,采用单光子探测器(EMCCD),一次曝光获取2D共聚焦图象。共聚焦扫描单元为Yokogawa的CSU-W1系列。CSU-W1扫描速度为1500-4000转/分钟,支持图像采集速度为200幅/秒,具有25um和50um两种针孔,和4倍于传统共聚焦扫描单元的视场。

减少光毒性损伤和光漂白
Revolution高速活细胞激光共聚焦,凭借Andor iXon+单光子探测器(EMCCD)的超高灵敏度,实现用强度极低的激发光照射样品,一次曝光获取高信噪比、高时间分辨率的2D共聚焦图像。更低的激发光强,更短的曝光时间,产生的光毒性和光漂白作用就轻,细胞没有受到损伤,就能实现更长时间的成像实验。

提高多维共聚焦成像速度
快速跟踪活细胞内的蛋白、细胞器的5维运动过程,才能得到完整、真实的生命过程。基于Andor创新的iCam控制技术,通过EMCCD与计算机间独有的双向通讯模式,对同步信号进行逻辑判断,获得与滤光片转轮、AOTF、高速压电陶瓷Z扫描平台等其它外围设备精确至微秒的同步性能,iCam技术改善了实验的精确性瞬时成像清晰度的革命性提升,可以让研究人员观察到以前无法看到的动态过程。

追踪成像从细胞膜到细胞内
利用全内反射荧光(TIRF)技术,Andor Revolution共享一套激光光源,集成TIRF照明装置,实现细胞膜(100-200nm TIRF成像)至细胞内(Confocal)全动态运动目标追踪成像一次实验获取多样品数据。

一次实验获取多样品数据

配置带有闭环回路控制的XY电动平台,可以同时获取多个视野、X-Y-Z-T-λ 5维的活细胞数据,这样就增加了数据统计学意义及实验的成功几率。可用于多孔板,进行药物靶点的筛选。


保证Z轴长时间稳定
所有显微镜都存在调焦机构热漂移的问题,如何进行稳定长时间活细胞观察时不出现离焦现象?系统中所配置的 Z轴零漂移检测系统,采用了近红外激光监测载片底部保持显微镜焦面位置稳定。

保证细胞良好生长
为保证长时间活细胞观察时细胞的良好生长,需要对细胞培养环境进行更好的调控,Andor Revolution为显微镜下的细胞提供与传统培养箱一样适宜的环境。

高效数据处理
活细胞成像中的高效数据处理很容易产生数十G的文件,以往的实验中数百M的数椐处理都是困扰实验人员的难题。Andor ImageDisk™技术让系统摆脱计算机内存限制,无限实时存储海量数椐,并在线处理、分析实验结果、同步显示3D、4D、5D图像,让您在漫长的实验等待过程中随时了解每一步细微的变化。
 
   
   
   
   
   
   
扫描单元
    CSU-X1
扫描速度
    1500-10000r/min
图像采集速度
    360-2000fps
针孔直径
    25μm
视场数
    10 X 7mm
温度控制
    37 °C ± 0.1 °C
湿度控制
    95% or higher
CO2 浓度

    范围: 0% to 20%, 0.1% increments

孔板类型:

    Flask: 25cm2 x 2, 75cm2 x 1

    Dish: Ø35mm x 5, Ø60mm x 2, Ø100mm x 1

    Well plate: 4-well x 1, 6-well x 1, 12-well x 1, 24-well x 1 and 96-well x 1

宏观观察:

    Image capture of whole vessel with dedicated camera (bird's-eye view)

    Camera head: color CCD camera (1280 x 960 pixels)

    Brightfield: backlight illumination

显微观察:

Magnification: 2x, 4x, 10x, 20x, 40x

Objective: Plan Fluor DL/Plan Fluor ADL series

Camera head: 2/3-inch cooled CCD camera (1M pixels, 15fps)

Phase contrast: high-intensity red LED illumination, automatic phase ring changeover

荧光光源(可选): LED V/B/G illumination, 3 filter blocks mountable

载物台行程:

    XY: 120 x 120mm (max. resolution: 8µm)

    Z: 6mm (max. resolution: 0.03125µm)

ZDC:
     AF focus point automatic detection
     15 consecutive Z-axis scans manually possible both above and below focus point
运行环境:

温度: 15 - 28°C

湿度: >60% 相对湿度


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